?????Chris Tachibana / ??  ??? / ?? ????? ???????2021-11-18 0:47:16
???CRISPR????????????????汛??

 

   “???????”?????????????????????????????????Versant Ventures??Jerel Davis????????????????快?2019???????????????????LSINW????????????????????妊????????????????“??????????????????孝?”?????????????????Bluebird Bio??妊????Philip Gregory?????????????????????????????????DNA?????DSBs??????DSBs?????????DNA???????

   DSB?????????????????????????NHEJ??????????????????????????志???????????(indels)???????????孝???????????車???????????鱱?????HDR??????????????DNA???DSB????????????????DNA?????HDR???忌???

   ?????????????????迄????扭????????ZFNs????????????????完?????????TALENs????韄??????????????竹????DSB?????????????(1)???????????????????????CRISPR-Cas9?????????????????????????????9??(2)???抉???????????宏???扶??????

   “??????????????????”竹?????????????????????????Jon Hennebold?????Hennebold??????????????????????抉?????????????????完???????????????????????????????????????抖??????????????????完???????竹?????????????????????????????CRISPR?????????????????????????“?????????????????24??48妊?????????”Hennebold???“??????????????????????”

 

CRISPR?????????????

 

   “????????????????????????????”竹??????????????????????????????????Charles Gersbach???“?????????????????Cas9??gRNA?????????????”Cas9???????????????????????????????????RNA??gRNA????????DNA竹???????DSB?????????璨?????????????????????????PAM?????妊????????CRISPR?????????Cas9???????gRNA???????NHEJ?車??????????DNA??羊???HDR?鱱?????

   ????????????????抉?????????????????曳????LSINW妊??????Ru Gunawardane?????CRISPR???????抉????????——??????????????????????????????????????忪??????????“????????????”?????抉??????抉????????????????????????CRISPR?????????????????????宏????????????????????????芍?????????????????????????????????????

   “????????????????????40??50??竹??”Gunawardane???“????????CRISPR?????????????gRNA??????????????竹????????????^”??????????宏????????????????抉??????抉??????抉???????????????????????????????????????

   ?抄?????????????????????????????CRISPR????????抉?????????????“???戒????????竹?????????????????完??”?????“??CRISPR?????????????????????”

 

CRISPR????

 

   ??????CRISPR?鱱???????????????PAM?????????????妊?Cas9?????????????????????????????忍????????????????????????妊??????????????完??????????????????????????????????????????抉????????宏?抉??????????????????????????????????

   ???????????????????????????????完??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

   ZFNs??竹??????????????????????Sangamo????????????????????????Ed Rebar??????Sangamo??????????????ZFN?????^????????竹????36???????????ZFN????????FokI???????????????????????????????????扭?DNA??????宏????????Sangamo?????????????????“???????”??????????ZFN???????????????????????????????FokI????扭????快?N-??C-?????????????????????????????????Sangamo???????????ZFN??????????????????Rebar?????“???????????????????????????????????????????????”

   ????????抉??孝?Rebar?????????ZFNs???????抉??????????????????快?28??????快?25??????????????(3)??????????????????Cas9妊?????????ZFNs?????????CRISPR??????????????芍?Sangamo??????????????????????????ZFNs?????????????????????????????

   TALENs??FokI???????????????????DNA??????????????????Y?????????????TALENs??Cas9妊??????ZFNs????宏?????扶???DNA???????????????????????????????????????妊?

   Dan Carlson??Recombinetics???????????Recombinetics????????竹????????????????????????????迄??????TALENs??CRISPR?????????抉???????????????????????????????宏??????“?????????????????????快??百?竹??”Carlson???????????????????????TALENs?????“??????????????”???????????????????????????抉???????????????????????????????????????宏?????????????????????“???????????????????”

   Meganucleases?????韄?????????????????????????????????40??????????????孝???????Cas9?妊??????????megaTALs??TALENS????????韄???????DNA?我???????????????竹????????????????Bluebird Bio??竹???????????????????Precision BioSciences????????????韄?????????????????????????

   竹?????????????·?????????抉?????????????Barry Stoddard??????50~60??韄???????????????????????????????????????????妊?“????CRISPR??????????????????”?????“??????????韄??????????????100??”????????Stoddard???????????????韄????????????????????????????????鮪??“100??????”???????????抉??抗???????

 

??????DSB

 

   ????HDR???忌?????????????????????竹??Stoddard???????????????竹???????????HDR“????????????????”?????????????????HDR?????????????????忌?????????????竹?????????SSRs????????

   “SSRs?????????快????”????????????????????????Marshall Stark?????“????????????????????????????????????DNA??”??????HDR?????HDR??????孝?SSRs??????????竹?????????DNA??Stark???????????????“SSRs????????完?????????????????100%??”SSRs????????????????????????DNA??汍??????????????????????????????????????????????????????????﹞??﹞????????技?????????????????????????SSRs???我??????????30~50?????????竹??

   Stark??????????SSRs????????????????????????1??????????????????????????忌???2????????????????縺???????????????SSR??????????????????????????DNA???快?扭?????????????“?????????曳?”Stark?????“????????????????????????????????????????抗?????????”

   ???????DSBs???????????抉????????????gRNA??????????我?DNA????????????扭??Cas9??Cas9???????????????????????????????????????????????DNA??DNA????籯????????????????????????????????????????????????????????Gersbach???“???DNA??????我???????”?‾??????抉???????????????抉?????????????????????????????????????????技??????X?????????????????(4)??

   ???????????????????????DSB????快???????????????????HDR?????????????????????????????????????David Liu妊??????????????????????????DNA???快????Cas9????????????????????????????????????????—???????????????—?????????????????????Liu???????????????????????????????????????????—????????????????—??????Liu???????????????????????????????????????????扭??????62%?????????????????

   Liu?????????2019??????????100????抉?????????????邦????????“?????技??????????????????????????????????????????????”???縺???????????????㊣????????????(5)??Liu????????????????????????——??????????????????????????????N???????????????????快?快??????

 

???????汛??

 

   ??????????????????????????Carlson????抉??????????????????????????????????????????????????????????????????????????Recombinetics??????TALENs????????????????????????????????????????????????2012??Carlson????????????????????????完???

   ????CRISPR?????????????????????????????????????竹??Carlson?????????CRISPR???????????????????抉??????????????我???完?????????????gRNAs????????????????????志??PAMs??????Cas??? (6)?????縺Cas13????RNA????RNA?????????????????????Liu??DNA???????????Beam Therapeutics???????????迄???????????????Liu?????????????????????L???????CRISPR??

   CRISPR????????????????????????妊??????????????DSB?????NHEJ??HDR????????????????迄??妊?????Cas9????????????????????完????抉??????????????????????Cas???????????????????“?????????????忌????????﹞????????????????????????快???????”Hennebold?????“??????抗????????”

   ???CRISPR????????????????????????Editas Medicine??Allergan???????????????????????CRISPR?????????????CRISPR???????????????????????????????????????????縺?????????????????????????Cas9????????????Cas9????????????????????(7)??

   ???????????????????????﹞???‾???——??汐???????????縺??﹞???????????T????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????“???”????宏???????????????????????????????????????志????﹞???????????宏??????????

   ??????CRISPR???﹞???迆????????????????????????Cas????gRNA?????DNA??Gunawardane?????????CRISPR??﹞???邦??????????????快???????????????????????????????孝????????????????????????????????????????SSRs??ZFNs??韄?????????????????????宏??????????妊????????????????

   ????????????抄??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????迆?????????????????????????????????????????完?????????????????????????????DNA?????????????????????????????“?????????????????????孝?”?????“?????????????????DNA??????????????????????????????????????”

   ???????????????CRISPR?????????????????????抉?????????????????????????????????????????“???????????????????????????”?????“?????????????????????????????????????????????????百?????????????????????”??

 

?羊?????

1. A. J. Bogdanove, et al., Nucleic Acids Res. 46, 4845-4871 (2018), doi: 10.1093/nar/gky289.

2. A. C. Komor, A. H. Badran, D. R. Liu, Cell 168, 20-36 (2017), doi: 10.1016/j.cell.2016.10.044.

3. D. E. Paschon et al., Nat. Comm. 10, 1133 (2019), doi: 10.1038/s41467-019-08867-x.

4. X. S. Liu et al., Cell 172, 979-992 (2018), doi: 10.1016/j.cell.2018.01.012.

5. L. Villiger et al., Nat. Med. 24, 1519-1525 (2018), doi: 10.1038/s41591-018-0209-1.

6. A. Pickar-Oliver, C. A. Gersbach, Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 20, 490-507 (2019), doi: 10.1038/s41580-019-0131-5.

7. C. T. Charlesworth et al., Nat. Med. 25, 249-254 (2019), doi: 10.1038/s41591-018-0326-x.

Chris Tachibana????????????????褚?????????????

??抖??“?????????????????www.aaas.org????????2019??9??27???????????”????????????https://www.sciencemag.org/features/2019/09/beyond-crispr-what-s-current-and-upcoming-genome-editing??

 

?????????? (???????2021??10??? ???·????)
??E-mail????      
| ??? | ???? |